高效液相色谱仪是一种基于液相色谱原理的现代分离分析技术，广泛应用于化学、食品、生命科学、医药及环境等领域。它通过高压驱动流动相，结合高效固定相，实现对复杂混合物中各组分的快速、高分辨率分离和定量检测。其核心原理基于混合物中各组分在固定相与流动相间的分配系数差异实现分离。该技术源于经典液相色谱法，通过引入气相色谱的塔板理论，将流动相输送压力提升至百万帕量级，配合小粒径填料色谱柱，使理论塔板数达到每米数万级，分离效率较传统方法提升1-2个数量级。
一、流动相系统保养
流动相更换与过滤
每日检查流动相余量，避免泵空转损坏。
使用前过滤流动相（如0.45μm滤膜），防止颗粒堵塞泵或色谱柱。
避免使用含颗粒或腐蚀性物质的溶剂（如未纯化的乙腈、磷酸）。
脱气处理
流动相需充分脱气（如超声波脱气、在线脱气机），防止气泡进入泵或检测器，导致基线波动或信号异常。
泵维护
定期更换泵密封圈（根据使用频率，通常每3-6个月），防止漏液。
清洗泵头：用异丙醇或甲醇冲洗泵头，去除盐沉积或有机物残留。
检查单向阀：若压力波动大，可能是单向阀污染，需拆下超声清洗或更换。
二、进样系统保养
进样针清洗
每次进样后用强溶剂（如甲醇）冲洗进样针，防止样品残留交叉污染。
定期更换进样针密封垫（如磨损导致漏液或重复性差）。
样品处理
样品需过滤（0.22μm或0.45μm滤膜）并脱气，避免堵塞色谱柱或进样阀。
避免高粘度或强腐蚀性样品直接进样。
三、色谱柱保养
冲洗与保存
每日分析结束后，用初始流动相（如甲醇-水）冲洗色谱柱30分钟，去除残留样品。
长期保存时，用纯有机溶剂（如甲醇）冲洗并封存，防止柱床干裂。
压力监测
记录色谱柱初始压力，若压力突然升高，可能是柱头污染或塌陷，需反向冲洗或更换。
避免极d条件
避免使用pH>8或<2的流动相（除非色谱柱耐受），防止硅胶基质溶解。
控制流速（通常0.5-1.5mL/min），避免高压损坏柱床。
四、检测器保养
紫外检测器（UV/VIS）
定期更换氘灯（通常2000小时），观察基线噪声是否增大。
清洗流通池：用异丙醇或甲醇冲洗，去除盐沉积或气泡。
荧光检测器
避免强光直射，防止光路老化。
定期清洗样品池，防止荧光淬灭物质积累。
示差折光检测器（RID）
保持恒温（如±0.1℃），避免温度波动影响基线。
避免使用高盐或高粘度流动相。
五、系统整体维护
泄漏检查
每日检查管路连接处、泵头、进样阀等部位是否漏液，及时更换密封垫。
软件与数据备份
定期备份仪器方法、序列和原始数据，防止系统崩溃导致数据丢失。
环境控制
保持实验室温度（15-30℃）和湿度（<70%），避免仪器受潮或过热。
避免震动或阳光直射，防止光学部件移位或老化。
六、定期深度维护
每季度维护
清洗溶剂瓶和溶剂管路，防止微生物滋生。
检查泵流速准确性（用电子天平称重法校准）。
润滑泵活塞（如使用硅脂）。
每年维护
联系工程师进行全面校准（如波长准确性、流速精度）。
更换脱气机膜、泵头过滤器等耗材。
